Test de diagnostic rapide

Le test immuno-chromatographiques est composé de 5 principales parties. Tout d’abord il y a la zone où la matrice est déposée. Deuxièmement, il y a une zone d’absorption où les analytes migrent afin d’entrer en contact avec les analytes. Troisièmement, il y a une zone où les analytes liés aux anticorps dopés aux nanoparticules  d’or entre en contact avec les anticorps fixés à la bandelettes afin de former des agrégats. Quatrièmement, il y a une zone où des anticorps spécifiques aux anticorps dopés à l’or sont situés afin de confirmer la validité du test. Finalement, une zone où un tampon absorbant est situé est à l’extrémité de la tige afin d’augmenter la vitesse du mouvement capillaire s’effectue.

Face à un cas d'angine, un TDR permet de détecter la présence d'un streptocoque β-hémolytique du groupe A (Streptococcus pyogenes), bactéries pouvant être responsables de complications rares mais graves. Mais en l'absence de cette bactérie, le traitement par antibiotique n'est très généralement pas justifié car l'angine peut être alors due à des virus ou d'autres bactéries pour lesquelles la guérison est spontanée. Or le diagnostic différentiel sur la base des seuls signes cliniques est très peu fiable. Par contre, le test, réalisable en moins de 10 minutes, permet de diagnostiquer avec quasi certitude la présence de streptocoques du groupe A. Le médecin généraliste réalise grâce à un écouvillon un frottis sur les amygdales de son patient puis dilue le prélèvement dans une solution test et y plonge une bandelette réactive. L'apparition d'une bande rose témoin dans les secondes qui suivent permet de confirmer le bon fonctionnement du test. La présence d'une deuxième bande rose révèlera la nature bactérienne (de l'angine à streptocoque du groupe A).

Une des  avantages des tests ICB  est que ces derniers fonctionnent d’une manière simple, facilitant ainsi la création d’un test robuste.

Dans un test ICB, les analytes entrent en contact du test au bas de la tige. Ces derniers se meuvent vers l’autre extrémité de la tige par diffusion et par capillarité. Ensuite, la matrice contenant les analytes vient réagir avec des anticorps conjugués à des nanoparticules d’or. Il y a des liaisons ioniques et covalentes se formant entre l’anticorps et l’analyte contenu dans la matrice. Ensuite, ces anticorps non fixés migrent vers l’autre extrémité de la tige en suivant la direction du flux de la matrice. Dans une certaine zone de la tige, il y a une forte concentration d’anticorps liés à la bandelette. Les analytes liés aux anticorps muni de nanoparticules d’or viennent s’y agréger[4]. Les nanoparticules d’or servent à la détection des agrégats d’analytes puisque ces dernières ont une coloration rosée en raison de leur absorbance dans la longueur d’onde à 575nm. 

Ainsi, si le test est positif, l’utilisateur verra une lanière rouge-rose apparaitre sur la bandelette du test. Si le résultat du test est négatif, une telle lanière n’apparaitra pas.

Par ailleurs, une seconde zone comportant des anticorps spécifiques aux anticorps suit la première zone afin de confirmer la fonctionnalité du test. Ainsi, un utilisateur obtenant un résultat négatif pourrait se demander s'il y a eu transport par capillarité des anticorps ou s'il y eu défaut de fabrication au niveau du test et douter de la présence de ces derniers. Ainsi, lorsque les anticorps spécifiques aux anticorps réagissent avec ces derniers, une zone rougeâtre apparait, confirmant la fonctionnalité du test. 

Par ailleurs, cette deuxième zone joue un rôle de confirmation de la robustesse du test dans plusieurs essais puisqu’elle permet d’éliminer une grande part des faux-positifs engendrés par une première liaison à la première zone.

Ainsi, il est très peu probable qu’il existe un analyte pouvant engendrer un faux positif en venant se lier à la fois à la première zone et à la seconde zone en se liant à l’anticorps spécifique à l’anticorps, et ce, tout en gardant la même coloration.

Les applications des tests ICB sont multiples. Un des tests les plus connus est, sans surprise, les tests de grossesse vendus dans les magasins de détail.

Une autre des applications est la quantification du glucose sanguin chez les diabétiques. Cette application est ensuite couplée à une source d’illumination permettant une quantification de l’absorbance dans certaine longueur d’onde et ainsi permettant d’établir avec certitude la concentration des glucides plasmatiques[5].

Par ailleurs,  un autre domaine d’application de ce genre de tests est le milieu environnemental. Certains anticorps spécifiques aux métaux lourds ont été développés et permettent de détecter leur présence dans plusieurs matrices, en commençant par l’eau destinée à la consommation humaine.

Finalement, une des applications les plus innovatrices est la détection de la contamination avec des agents pathogènes. Avec l’avènement de menaces mondialisées à grande échelle ayant des causes anthropiques ou non de proliférations de virus et autres pathogènes à grande échelle, cette méthode de détection pourrait s’avérer grandement utile.

Une des avantages de cette technique est le peu de composantes mobiles. Ainsi, en comportant peu de ces composantes, ce test est moins prompt à des défauts mécaniques. Un autre des avantages de cette technique est un corollaire de cette première prémisse. Ainsi avec les reproductions à grande échelle des anticorps, il est possible de produire en masse ces tests permettant ainsi d’offrir ces derniers à faible coût.  Ainsi, en offrant ces tests à faible coût, il est possible de répandre ces tests et ainsi ces derniers sont largement utilisés comme première ligne de diagnostic dans plusieurs domaines médicaux, mais aussi dans des domaines environnementaux[6].

• Méthode immuno-enzymatique ELISA
• Test de grossesse
• Bandelette urinaire
• Indicateur coloré

• Tests de Diagnostic Rapide des angines à Streptocoque du groupe A, Evaluation comparative de 16 dispositifs médicaux de diagnostic in vitro, juillet 2002. Sur le site de l'AFSSAPS.
• Les tests de diagnostic rapide, Cours du D^r Pierre Aubry, Université Bordeaux 2
• (en) Principles of Immunochemical Techniques Used in Clinical Laboratories, Marja E. Koivunen, Richard L. Krogsrud. LABMEDICINE,� Volume 37 Number 8, �August 2006.

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