Spectre d'absorption de la chlorophylle brute

Lorsqu’une lumière incidente polychromatique traverse une solution colorée, les différentes radiations composant la lumière se font plus ou moins absorbées par la solution selon leur longueur d’onde λ. (ex : spectres ci-contre)

On peut alors définir une grandeur appelée absorbance, notée A, qui caractérise la capacité d’une espèce chimique à absorber une radiation de longueur d’onde donnée. Plus une espèce chimique aura tendance à absorber une radiation et plus l’absorbance A pour cette radiation sera élevée. L’absorbance est toujours une valeur positive.

L’appareil permettant de mesurer l’absorbance d’une solution pour une longueur d’onde donnée s’appelle un spectrophotomètre. En lui demandant de mesurer l’absorbance d’une solution pour chaque radiation du domaine visible, on peut alors obtenir le spectre d’absorption ci-contre.

• 1 spectrophotomètre
• cuves de spectrophotomètre
• 2 fioles jaugée de 50,0 mL + bouchon
• 2 fioles jaugée de 100,0 mL + bouchon
• 1 pipette jaugée de 20,0 mL
• 1 pipette jaugée de 10,0 mL
• 1 pipette jaugée de 5,0 mL
• 1 poire d’aspiration
• 2 pipettes souple
• 5 béchers de 25 mL
• 1 crayon à verre
• 1 pot de yaourt
• 1 pissette d’eau distillée
• 1 flaconnet d’une solution de permanganate de potassium à C₀ = 7,0 × 10⁻⁴ mol L⁻¹

Doser une espèce chimique consiste à déterminer sa concentration massique ou molaire dans une solution.

Il existe plusieurs techniques de dosage :

• Dosage par étalonnage (on compare la solution à doser à une gamme de solutions de référence, les solutions étalons)
• Dosage par titrage (le dosage est réalisé en faisant réagir chimiquement l’espèce chimique à doser, c’est une méthode destructive)

1. La solution de permanganate de potassium paraît magenta et diffuse la radiation bleue et rouge par synthèse additive. Elle absorbe donc la radiation verte.
2. L'absorption de la solution dépend de la concentration de l'espèce colorée et de l’épaisseur de la solution.
3. On prépare une échelle de teinte, c'est-à-dire plusieurs solutions de permanganate de potassium à concentrations différentes déconnues. Ces solutions s'appellent des solutions étalons. On mesure l'absorption de chaque solution étalon puis on compare ces mesures à l’absorption de Dakin.

4. ${\displaystyle F_{1}={\frac {C_{0}}{C_{1}}}={\frac {7,0\times 10^{-4}}{3,5\times 10^{-5}}}=20}$

   La solution fille sera 20 fois moins concentrée que la mère donc le volume prélevé (qui correspond au volume de la pipette) devrait être 20 fois plus faible que le volume mère (qui correspond au volume de la fiole).

   ${\displaystyle V_{0}=5,0\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle V_{1}=20\times 5,0\ {\text{mL}}=100,0\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle F_{2}={\frac {C_{0}}{C_{2}}}={\frac {7,0\times 10^{-4}}{7,0\times 10^{-5}}}=10}$

   ${\displaystyle V_{0}=5,0\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle V_{2}=10\times 5,0\ {\text{mL}}=50,0\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle F_{3}={\frac {C_{0}}{C_{3}}}={\frac {7,0\times 10^{-4}}{1,4\times 10^{-4}}}=5}$

   ${\displaystyle V_{0}=10,0\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle V_{3}=5\times 10,0\ {\text{mL}}=50,0\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle F_{4}={\frac {C_{0}}{C_{3}}}={\frac {7,0\times 10^{-4}}{2,8\times 10^{-4}}}=2,5}$

   ${\displaystyle V_{0}=10,0+10,0\ {\text{mL}}=20\ {\text{mL}}}$

   ${\displaystyle V_{4}=2,5\times 20,0\ {\text{mL}}=50,0\ {\text{mL}}}$